[SS-028]Penil Dorsal Sinirin Korpus Kavernosum ile ilişkisinin fizyolojik ve histolojik analizi. Ereksiyon innervasyonunda yeni bir yolak mı?Zafer Kozacıoğlu1, Seda Vatansever2, Tuna Önal2, Necip Kutlu3, Fehmi Özel3, Bülent Günlüsoy4, Bilal Habeş Gümüş52Celal Bayar Üniversitesi, Histoloji ve Embryoloji ABD 3Celal Bayar Universitesi Fizyoloji ABD 4Bozyaka Eğitim ve Araştırma Hastanesi Üroloji Kliniği 5Celal Bayar Üniversitesi Üroloji ABD AMAÇ: Penisin dorsal sinirinin kavernöz doku içerisine dallar verdiğinin gösterilmesinin ardından, bu yapının korpus kavernozum ile ilişkisini ve bunun ereksiyon meknizmasına olası katkılarını histolojik ve fizyolojik açıdan ortaya koymak. MATERYAL-METOD: Çalışmamızda 4-5 aylık 300-400gr ağırlığında 10 adet Wistar albino sıçan kullanıldı. Deney hayvanları elektriksel aktivite(n=6) ve kavernöz içi basınç kaydı(n=4) için iki gruba ayrıldı. Anestezi; intraperitoneal Na-Pentobarbital(80-90 mg/kg) ile sağlandı. Mikrodisseksiyon ile penisin dorsal siniri disseke edildi ve elektrostimülasyon için dorsal sinire bilateral olarak çengel elektrod yerleştirildi. Kavernöz içi basınç kaydı için; heparin solüsyonu ile yıkanmış polietilen kateter, 23-gauge kanül ile birleştirildi ve sağ korpus kavernosuma yerleştirildi. Stimülasyon Protokolü:Stimülatör tarafından üretilen monofazik kare dalga pulslar bipolar çengel elektrod yardımı ile dokuya iletildi. Stimülasyon parametreleri; genlik(amplitude) 7 Volt, frekans16 Hz, uyarı süresi 5 msn olarak seçilmiştir. Sinyal kaydı:Basınç kateteri basınç transdüserine bağlandı ve sinyal yükseltilerek sayısal olarak kaydedildi. EMG sinyalleri de yükseltilerek filtre edildi. Filtrasyon parametreleri; 10 kHz Lowpass-300 Hz Highpass olarak seçildi. Sinyal örnekleme hızı 4000 örnek/saniye olarak belirlendi. Analiz:Elektrostimülasyon öncesi ve sonrasındaki elektriksel aktivite amplitüdleri mutlak değer ortalamaları hesaplanarak karşılaştırıldı. Aynı şekilde, kaydedilen kavernöz içi basınç değerleri ortalamaları da elektrostimülasyonun durumuna göre karşılaştırıldı. İşlem sonrası efferent yolaklardan gelebilecek kavernöz sinire bağlı bir etkileşimin engellenmesi için ikinci bir seri uyarıdan hemen önce dorsal penil sinir daha proximalden kesildi ve aynı işlem tekrarlandı. Histolojik değerlendirme:Rutin fiksasyon ve parafinleme işlemi sonrası 4-5mm’lik kesitler halinde eNOS, iNOS ve nNOS primer antikorları için indirekt immünohistokimya metodu ile boyandı. İmmünreaktivite; iki bağımsız araştırmacı tarafından zayıf(+), orta(++) ve güçlü(+++) olarak gruplandı. BULGULAR: Elektrostimülasyona bağlı olarak ve istatistiksel olarak anlamlı şekilde; kavernöz içi düz kaslardaki elektriksel aktivitenin azaldığı, basınç değerlerinin ise eşzamanlı olarak arttığı gözlenmiştir(şekil1, tablo 1). Sinirin proximalden kesilmesinden hemen sonra verilen uyarı ile de benzer EMG aktivitesi kaydedilebilmiştir. İmmünohistokimyasal olarak nNOS; hem korpus kavernozumun içinde hem de dartos içi derin penil faysa içerisindeki sinir liflerinde (++) boyandı. Aynı zamanda nNOS penisin dorsal yüzündeki tunika albuginea içerisinde de yer yer pozitif idi. iNOS ise sadece korpus kavernozum içerisinde (++) olarak izlendi. SONUÇ: Penisin dorsal siniri klasik olarak bilindiği şekliyle duyusal işlevi yanında, ereksiyon hemodinamisinde de aktif rol almaktadır. Histologic and Physiologic Analysis of the relationship between the Dorsal Nerve of the Penis and the Corpus Cavernosum: A new tract on the innervation of penile erection?Zafer Kozacıoğlu1, Seda Vatansever2, Tuna Önal2, Necip Kutlu3, Fehmi Özel3, Bülent Günlüsoy4, Bilal Habeş Gümüş52Celal Bayar University, Dept of Histology 3Celal Bayar University, Dept of Physiology 4Bozyaka Training and Research Hospital, Urology Clinic 5Celal Bayar University, Dept of Urology PURPOSE: To understand the role of the penile dorsal nerve in the erection mechanism by studying its histological and physiological relationship with the corpus cavernosum after the finding that it gives branches into the corpus cavernosum. MATERIALS-METHODS: Ten Wistar albino rats, 4-5 months old weighing between 300-400gr were used. The rats were sorted into the electrical activity(n=6) and the intracavenous pressure(n=4) groups. Na-pentobarbital was used for anesthesia(intraperitoneal, 80-90 mg/kg). By microdissection, the dorsal nerve was prepared and hook electrodes were placed bilaterally. For intracavernous pressure measurement; poliethylen catheter washed with heparin was attached to a 23 G cannula inserted into the right corpus cavernosum. Stimulation protocol:Monophasic square pulses generated by the stimulator were transferred via bipolar hook electrodes(amplitude 7 V, frequency 16Hz, signal duration 5msec). Signal recording:After amplification, the pressure was recorded as numeric values. EMG signals were filtered after amplification. Filtration parameters were:10kHz Lowpass-300Hz Highpass. Signal sampling was 4000 samples/sec. Analysis: Mean intracavernous pressure values and the amplitudes of electrical activity before and after the electrostimulation were compared as mean absolute values. To inhibit any possible efferent interaction by the cavernous nerves, the dorsal nerve was transected more proximally and the procedure was repeated immediately. Histologic Evaluation:Following routine fixation and parafinization, penile tissues were stained for primary antibodies against eNOS, iNOS and nNOS using indirect immunohistochemical methods. Immunereactivity was examined by two independent researchers and grouped as weak(+), moderate(++) and strong(+++). RESULTS: After electrostimulation; the decrease in the electrical activity of the intracavernous smooth muscles and the increase in the intracavernous pressure were statistically significant. Findings were reproducable after transecting the dorsal nerve proximally prior to a second stimulation. eNOS was moderately positive(++) in vascular endothelial cells that are not only in corpus cavernosum but also in other tissues of penis. nNOS was moderately positive(++) in corpus cavernosum and in the neuron bundle that is in deep penil fasia under the tunica dartos and iNOS was observed as moderately positive(++) only in corpus cavernosum. CONCLUSION: Dorsal nerve of the penis, far from the classical knowledge, as being solely sensorial, also has active role in the hemodynamic process of erection. Şekil 1 Figure 1 Dorsal sinirin elektrostimülasyonuna bağlı olarak korpus kavernosumun elektriksel aktivitesi ve kavernöz içi basınç değişimi. (1): Elektrostimülasyondan önce, (2): Elektrostimülasyon sırasında the electrical activity and the pressure profile changes inside the corpus cavernosum related with the electrostimulation of the dorsal nerve of the penis. (1): Prior to electrostimulation, (2): During electrostimulation Tablo 1
Elektrostimülasyon öncesi ve sonrası elektriksel aktivitedeki ve kavernöz içi basınçtaki değişimler Table 1
The changes in the electrical activity and intracavernous pressure before and after electrostimulation |