[SS-023]

Hiperoksalüriye Bağlı Renal Tubül Epitel Hücre Apoptosisi Oksidatif DNA Hasarı Aracılığı ile Gerçekleşmektedir

¹Yeditepe Üniversitesi Tıp Fakültesi, Üroloji A.B.D
²Yeditepe Üniversitesi Tıp Fakültesi, Endokrinoloji ve Metabolizma Hastalıkları B.D.
³Yeditepe Üniversitesi Tıp Fakültesi, Biyokimya A.B.D.
⁴Bağcılar Eğitim ve Araştırma Hastanesi, İç Hastalıkları Kliniği
⁵Fatih Sultan Mehmet Eğitim ve Araştırma Hastanesi, Üroloji Kliniği
⁶Kastamonu Anadolu Hastanesi, Üroloji Kliniği

Amaç
Ürolitiasiz gelişiminde kritik rol oynasa da renal tübül hasarının nasıl geliştiği tam olarak bilinmemektedir. Oksidatif DNA hasarı hücresel hasarın üniversal göstergesi olarak kabul edilmektedir. Urolitiaziste dolaylı çalışmalarda oksidatif DNA hasarının arttığına dair bulgular mevcuttur. Bu çalışmanın amacı hiperokalüri oluşturulmuş ratlarda oksidatif DNA hasarının renal tübül hücre apoptosisi ile ilişkisini araştırmaktır.
Yöntem
Çalışmaya 16 Sprague Dowley rat alınmıştır. Grup I (n=8): Hiperoksaluri grubu; Grup II (n=8): Kontrol grubu. Hiperoksalüri diyette 2 hafta boyunca verilen %0.75 etilen glikol ile oluşturulmuştur. Takiben 24. saat, 14. gün, 28. günlerde 24 saat idrar toplanarak 8-hydroxydeoxyguanosine (8-OHG) and oksalat atılımı ölçülmüştür. Ratlar 28. gün ötanazi yapılarak sağ böbrekleri alınmış ve apoptosis belirteçlerine (Fas, TNF-α) immünhistokimyasal yolla bakılmıştır.
Bulgular
Kontrollere kıyasla hiperoksalüri grubunda 8-OHdG atılımı yüksektir (p<0,05). Bu artış 24. saatte başlar ve 28 gün boyunca sabit kalır. 8-OHdG atılımı idrar oksalat atılımı (p=0,03, r=0,53) ve renal tubül epitel hücre apoptoz belirteçleri ile (p=0,007, r=0,710) pozitif korelasyon göstermektedir.
Sonuçlar
Hiperoksalüri oksidatif DNA hasarını indüklemektedir ve bu mekanizma renal tübül hücre apoptosisinden sorumlu olabilir. Bu sonuçlar hem hastalık patogenezinin açıklanması konusunda hem de sistemik hastalıklarla ilişkileri belirlemede yardımcı olabilir.

---

Hyperoxaluria Induced Renal Tubular Epithelial Cell Injury is Mediated by Oxidative DNA Damage

Faruk Yencilek¹, Hasan Aydın², Jale Çoban³, Hasbey Hakan Koyuncu¹, Hakan Sarı⁴, Yavuz Bastuğ⁵, Sadi Turkan^6
1Yeditepe University Medical Faculty, Department of Urology
²Yeditepe University Medical Faculty, Endocrinology and Metabolism Department
³Yeditepe University Medical Faculty, Department of Biochemistry
⁴Bağcılar Education and Research Hospital, Department of Internal Medicine
⁵Fatih Sultan Mehmet Education and Research Hospital, Department of Urology
⁶Kastamonu Anadolu Hospital, Urology Department

Aim
Renal tubular injury is an essential component of renal stone disease. Several mechanisms were proposed to explain how renal tubular injury occurs. But the exact mechanism is still obscure. Oxidative stress is closely related in pathogenesis and oxidative damage to DNA is one of the mechanisms of cellular injury. Although increase in oxidative DNA damage markers was reported in urolithiasis, none of them are conclusive on the direct effect of calcium oxalate crystals. The aim of this study was to investigate whether oxidative DNA damage and renal tubular cell apoptosis makers can be induced by hyperoxaluria in an animal model study.
Materials and Methods
A total of 16 Sprague Dowley rats have been included into study. Group I (n=8): Hyperoxaluria-induced group; Group II (n=8): Control group. Twenty four hour urine samples were collected at 24 hour, 14 day and 28 day after hyperoxaluric diet for the analysis of 8-hydroxydeoxyguanosine (8-OHG) and oxalate excretion. Rats were euthanized at 28th day and right kidney was taken for immunohistochemical analysis for apoptosis markers Fas/Fas-ligand, TNF-α/TNFR1.
Results
Compared to controls, 8-OHdG excretion was found to be higher in hyperoxaluric group (p<0,05). It began to rise early at 24-hour samples and stayed high throughout 28-day period. It was positively correlated with urinary oxalate excretion (p=0,03, r=0,53) and renal tubular epithelial cell apoptosis markers (p=0,007, r=0,710).
Conclusions
Results indicate hyperoxaluria induced oxidative damage to DNA mediates renal tubular injury. This may contribute to the pathophysiology of renal stone disease and help to explain its relationship with other systemic diseases.

---

Figür 1

Figure 1

Çalışma döneminde idrar okzalat ve 8-hidroksiguanozin ekskresyonu

Urinary oxalate and 8-hydroxyguanosine excretion throughout the study period

Figür 2

Figure 2

İdrar 8-OHdG salınımı idrar oxzalat salınımı ile pozitif olarak koreledir.

Urine 8-OHdG excretion is positively correlated with urinary oxalate excretion

Tablo 1

Table 1

Hiperokzalurik ve kontrol sıçanların renal tübüllerinde immunohistokimyasal boyanma paterni

Immunohistochemical staining patterns of renal tubules in hyperoxaluric and control rats