[SS-007]

Endotelin-1 Reseptör Antagonisti Bosentan'ýn Diabetik Ratlarda Testiküler Doku Oksidan ve Antioksidan Düzeylerine Etkisi

¹Memorial Þiþli Hastanesi Üroloji Kliniði, Ýstanbul
²Atatürk Universitesi Týp Fakültesi, Farmakoloji AD, Erzurum
³Ýbrahim Çecen Üniversitesi Eczacýlýk Fakültesi, Biyokimya AD, Aðrý
⁴Kýrýkkale Universitesi, Veteriner Fakültesi, Patoloji AD, Kýrýkkale

Amaç: Ýnsan seminal plazmasýnda endotelin (ET) varlýðý daha önce belirtilmiþ olmasýna raðmen, fizyolojik etkileri konusunda net bilgiler yoktur. Bu çalýþmada, deneysel olarak diyabetes mellitus (DM) oluþturulan ratlarda testiküler doku ve oksidan ve anti-oksidan düzeyleri deðiþiklikleri ve ET-1 reseptör antogonisti Bosentanýn diyabetik ratlarda testisküler doku oksidatif stres üzerine etkileri incelenmiþtir.
MATERYAL-METOD: Toplam 24 adet Albino-Wistar rat eþit sayýda denek içeren 4 gruba ayrýldý. Grup-1 saðlýklý kontrol grubu; Grup-2: DM grubu; Grup-3: DM+Bosentan 50 mg/kg; Grup-4: DM+Bosentan 100 mg/kg. DM intraperitoneal streptozosin (STZ) 60 mg/kg enjeksiyonu ile oluþturuldu. DM geliþimini takiben grup3’de yer alan deneklere 60 gün süre ile oral Bosentan 50 mg/kg; Grup-4’de yer alan deneklere ise Bosentan 100 mg/kg oral yolla uygulandý. Tedavi süresi sonunda orþiektomi uygulanarak testis dokusunda süper oksit dismutaz (SOD) aktivitesi, glutatyon (GSH) ve malondialdehid (MDA) düzeyleri ölçüldü. Ayrýca, seminal parametreler deðerlendirildi ve testiküler doku histopatolojik incelemesi yapýldý.
Sonuçlar: DM oluþturulan ratlarda anti-oksidan SOD ve GSH düzeyleri azalýrken, oksidatif stres göstergesi olarak MDA düzeyi artýþ gösterdi. Bosentan uygulamasý sonrasý ise 100 mg ile daha belirgin olmak üzere anti-okidan enzim düzeyleri artýþ gösterirken; MDA düzeyleri azaldý. Tüm deðiþimler istatistiksel olarak anlamlý izlendi.
DM grubunda seminifer tubül boyunda kýsalma ve bazal membaýn kalýnlaþmasý; interstisiyel dokuda dejenerasyon ve Leydig hücre sayýsýnda azalma izlenirken, Bosentan ile deðiþimlerin azaldýðý; özellikle Bosentan 100 mg/kg ile kontrol grubuna yakýn histopatolojik bulgularýn izlendiði gözlendi. Bu deðiþimler istatistiksel olarak anlamlýydý (Tablo-1) (p<0.05)
Sperm parametrelerinde ise DM grubunda hem sayý hem de motilite azalýrken, Bosentan ile doza baðýmlý olmak üzere anlamlý deðiþim izlendi (Þekil-1 ve Þekil-2).
Tartýþma: Sistemik bir hastalýk olan DM testis üzerinde önemli etkiler ortaya çýkarmakta ve seminal parametreleri etkileyerek erkek infertilitesinde rol oynamaktadýr. DM’un bu etkisi gerek testiküler vaskülariteyi bozarak doku dejenerasyonu yapmasý gerekse oksidatif stres üzerine olan etkisi ile ilgili olduðu düþünülmektedir. ET-1 reseptör antagonisti olan Bosentan doza baðýmlý olarak DM’un testiküler etkilerinde koruyucu rol oynamakta ve seminal parametreleri iyileþtirmektedir.

---

The Effect of Bosentan, an Endothelin-1 Receptor Antagonist on Testicular Tissue Oxidant and Antioxidant Levels in Diabetic Rats

Erdal Alkan¹, Rüstem Anýl Ugan², Mehmet Murad Baþar¹, Zekai Halýcý², Mevlana Derya Balbay¹, Harun Ün³, Hasan Tarýk Atmaca^4
1Memorial Sisli Hospital, Department of Urology, Istanbul
²Ataturk University, Faculty Medicine, Department of Pharmacology, Erzurum
³Ýbrahim Cecen University, Faculty of Pharmacy, Department of Biochemistry, Aðrý
⁴Kýrýkkale University, Faculty of Veterinery Medicine, Department of Pathology, Kýrýkkale

PURPOSE: Physiological effects of endothelin (ET) in the seminal plasma have been debatable. We aimed to look into changes in testicular tissue oxidant and anti-oxidant levels in rats with experimentally induced diabetes mellitus (DM), and also the effects of Bosentan an ET-1 receptor antagonist on the testicular tissue oxidative stress reactions.
MATERIALS-METHODS: A total of 24 Albino-Wistar rats were equally allocated in 4 groups. Group 1 consisted of healthy animals as a control group, Group 2 consisted of animals with DM induced with injection of 60 mg/kg of streptozosin intraperiotenally, Groups 3 and 4 included animals with DM treated with oral Bosentan 50 mg/kg, and 100 mg/kg, respectively. At the end of 60 days of the treatment, orhiectomies were done and tissue levels of superoxyde dysmutase (SOD), glutathione synthetase (GSH) and malondialdehyde (MDA) were studied. Seminal parameters measured and testicular histopathological evaluation were also done.
RESULTS: Tissue levels of oxidant molecules SOD and GS were decreasesd, whereas MDA level was increased. Increase in antioxidant enzyme levels and decrease in MDA levels were most prominent and statistically significant with oral Bosertan 100 mg/kg (Table 1) (p<0.05).
Histologically, the length of seminiferous tubules were shortened, the thickness of the basal membrane was increased, degeneration in the interstitial tissue and decrease in the number of Leydig cells were noted as well as decrease in sperm counts and motility in Group 2. Histological changes were found to be alleviated and achieved a much normal looking histology and sperm counts and motility were also found to be increased in Groups 3 and 4 in a dose dependant manner (Figure-1 and Figure-2).
DISCUSSION: Testicular effects of DM a systematic disease is profound, having a negative impact on male infertiliyt through seminal parameters as a result of either detoriating testicular vascular structures resulting in tissue degeneration or through inducing oxidative stress reactions. Bosentan prevents detoriating effects of DM on testicular tissue and improves seminal parameters in a dose dependent manner.

---

Sžekil-1:Bosentan'in diabetik ratlarda sperm sayisi uzerine etkisi

Figure-1: Effect of bosentan, on sperm count of diabetic rats

Sekil-2:Bosentan'in diabetik ratlarda sperm motilitesi uzerine etkisi

Figure-2: Effect of bosentan, on sperm motility percentage of diabetic rats

Tablo-1:Bosentan'in diabetik ratlarda testis SOD, GSH ve MDA düzeylerine etkisi

	SOD* (U/mg protein)	GSH* (nmol/mg protein)	MDA* (nmol/mg protein)
Kontrol	42,847,94c	2,450,74c	0,790,24a
DM	24,986,23a	1,050,39a	2,470,36c
STZ+BOS 50mg/kg	34,818,67b	1,810,44b	1,230,38b
STZ+BOS 100 mg/kg	35,167,82b	1,750,44b	1,310,44b

STZ:Streptozosin, BOS:Bosentan
*Tek yönlü ANOVA ve Duncan çoklu karþýlaþtýrma testi, p<0.05

Table 1: The effects bosentan on testis SOD, GSH and MDA level of diabetic rats

	SOD* (U/mg protein)	GSH* (nmol/mg protein)	MDA* (nmol/mg protein)
Sham	42,847,94c	2,450,74c	0,790,24a
DM	24,986,23a	1,050,39a	2,470,36c
STZ+BOS 50mg/kg	34,818,67b	1,810,44b	1,230,38b
STZ+BOS 100 mg/kg	35,167,82b	1,750,44b	1,310,44b

Note: STZ; Streptozotocin, BOS: Bosentan
*One way ANOVA and the Duncan's Multiple Comparison Test,p<0.05.